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人臍帶血干細胞分離液KIT醫用級
產品編號:LGS1068CB05
別名 人臍帶血干細胞分離液KIT醫用級 
英文名  
人臍帶血干細胞分離液KIT醫用級
中文名稱:人臍帶血干細胞分離液KIT醫用級
中文別名:人臍帶血干細胞分離液KIT醫用級
產品類別:造血干細胞的分離
 
產品編號:LGS1068CB05
 
產品名稱:人臍帶血干細胞分離液KIT醫用級
 
產品規格:200ml/KIT
 
產品價格:¥1800.00元

人臍帶血干細胞分離液KIT說明書
 
【產品簡介】
 
臍帶血收集采用自然放血且從產房采集到細胞分離時長一般大于 2 小時,與外周血靜脈采血且及時分離相比會影響分離效果,為此,灝洋優化配方以提高臍帶血干細胞分離得率,請廣大醫療及科研用戶使用并提出寶貴意見。
 
【包裝規格】
 
  名稱 產品編號 規格
       
A 人臍帶血干細胞分離液 LGS1068CB-200 200ml
       
B 紅細胞沉降液(贈品) HES-TBD550 200ml
       
C 清洗液(贈品) 2010X1118-100 200ml
       
D 說明書   1 份
       
 
【實驗前準備】
 
適用儀器:最大離心力可達 1200g 的水平轉子離心機
 
【檢驗方法】
 
全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。
 
方法一:
 
  • 新鮮抗凝臍血與生理鹽水及紅細胞沉降液(6%羥乙基淀粉)按 1:1:1 的比例混合,自然沉降 30min(具體沉降時間應根據不同樣本對應調整以保證沉降效果)。
  • 沉降后取上層液體,300g 離心 15min,棄去 50%上清,以剩余 50%上清重懸沉淀,制成細胞懸液。
 
  • 取 50mLPBMC 高效離心管,加入 15ml 分離液,200g 離心 1min 將分離液全部離心至隔片以下,傾去隔片上殘留的分離液。
 
  • 將細胞懸液加至隔片上,400-500g,離心 20-30min。
 
  • 離心后取白色環狀目的細胞層,清洗后重懸備用。
 
方法二:
 
  • 新鮮抗凝臍血與紅細胞沉降液(6%羥乙基淀粉)按 1:1 的比例混合。
 
  • 取 50mLPBMC 高效離心管,加入 15ml 分離液,200g 離心 1min 將分離液全部離心至隔片以下,傾去隔片上殘留的分離液。
 
  • 將與沉降液混勻的樣本加至隔片上,400-500g,離心 25min。
 
  • 離心后取白色環狀目的細胞層,清洗后重懸備用。
 
【注意事項】
 
1. 全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結果,
 
最好在取血 2h 內進行實驗,血液存放時間越長,細胞分離效果越差。血液放置超過 6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。
 
  • 本實驗最好不要使用高聚合材質(如聚苯乙烯)的塑料制品,應使用無靜電、低靜電離心管及未經堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。
 
  • 如實驗后細胞得率或活性過低,請聯系技術支持以尋求幫助。
 
【儲存條件及有效期】
 
常溫保存,有效期 2 年。本品易感染細菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
 
封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現白色結晶,影響分離效果。
 
【參考值(參考范圍)】
 
本實驗干細胞提取率及純度均大于 80%。
 
下表為成年人外周血中各種細胞的數量及比例,用戶可適當進行參考。
 
  紅細胞   白細胞   血小板
           
    (4.0-10.0)×109  
  (4.0-5.5)×1012       (1.0-3.0)×1011
含量(個/L) 中性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞
           
    50%-70% 20%-40% 3%-8%  
           
【相關實驗技術方案】        
 
  • 所獲得干細胞的培養技術。
 
  • 所獲得干細胞的核酸提取技術。
 
  • 所獲得干細胞的鑒定方法A.流式細胞技術B.免疫組化技術C.原位雜交技術
 
D.PCR 技術
 
 
【可能存在的問題及解決方法】
 
1.  由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:
 
 
       
  出現情況 出現原因 建議解決方案
       
  離心后目的細胞存在于血漿層或稀釋液層 轉速過小或離心時間過短 適當增減轉速
     
  離心后目的細胞存在于分離液中 轉速過大或離心時間過長
   
       
  離心后白環層彌散 細胞密度過大 調整細胞密度
     
  離心后白環層太淺或看不見 細胞密度過小
   
       
 
  • 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關。不同地區客戶可根據當地情況對離心條件進行適當調整。建議對離心條件進行調整時,恒定離心時間,對離心轉速進行調整。
 
  • 本分離液依照國際標準,全部使用藥用級原料,性能指標與國產同類產品略有不同,可
 
能出現紅細胞沉降不完全的情況,可以適當加大離心轉速。
 
注:在對離心條件進行調整時,離心轉速的加減以 50-100g 為基數,直至達到最佳分離效果,離心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準。
 
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